第一部分　基础知识
第一章　实验室安全防护知识
　一、化学试剂安全防护知识
　二、放射性核素安全防护知识
　三、生物安全知识
　四、用电安全及其他安全知识
第二章　分子生物学实验室标准及功能分区
　一、生物学约束
　二、物理学约束
　三、标准实验室的组成
第三章　分子生物学实验室常规仪器设备
　一、紫外分光光度计
　二、离心机
　三、制水系统
　四、PCR仪
　五、凝胶成像系统
　六、酶标仪
　七、微量移液器的使用
　八、pH计
　九、生物安全柜
　十、超净工作台
　十一、凝胶电泳系统
　十二、高压蒸汽灭菌器
　十三、液氮罐的使用
第四章　实验基本技能与实验室常规基础知识
　一、常用器材的清洗处理
　二、实验用品及实验环境的消毒灭菌
　三、细菌接种技术
　四、细菌培养技术
　五、细胞培养技术
　六、实验材料的采集与处理
　七、试剂及样品的保存
　八、溶液的混匀法
　九、实验室废弃物的处理
第二部分　实验
　实验一　质粒DNA的提取及鉴定
　实验二　构建重组质粒EGFP-pET28a
　实验三　阳性克隆的筛选与鉴定
　实验四　IPTG诱导EGFP蛋白表达
　实验五　SDS-PAGE蛋白质电泳
　实验六　重组蛋白的分离与纯化
　实验七　多克隆抗体的制备
　实验八　间接ELISA法测定抗体效价
　实验九　Western blotting检测抗体含量
　参考文献
附录
　附录一　核酸及蛋白质数据
　附录二　分子克隆中常用缓冲液与试剂的配制
　　1．Tris缓冲液
　　2．磷酸缓冲液
　　3．电泳缓冲液和上样缓冲液
　　4．其他常用缓冲液
　附录三　常用贮存液的配制
　附录四　常用酶的配制
　　1．溶菌酶
　　2．蛋白水解酶类
　　3．无DNA酶的RNA酶
　附录五　细菌培养基、抗生素的配制
　　1．常用培养基
　　2．常用抗生素溶液
　附录六　溴化乙锭(EB)的净化处理
　　1．EB浓溶液(即质量浓度>0．5g/L)的净化处理
　　2．EB稀溶液(如含有0．5 mg／L EB的电泳缓冲液)的净化处理
　　3．其他处理方法
　附录七　常用试剂的作用
　　1．水饱和酚溶液去除蛋白质的原理
　　2．溶液Ⅰ：溶菌液
　　3．溶液Ⅱ：NaOH-SDS液
　　4．溶液Ⅲ：3 moL／L NaAc(pH 4．8)溶液
　　5．无水乙醇沉淀DNA的原理
　　6．乙醇沉淀DNA时，加NaAc或：NaCI的作用
　　7．使用乙醇沉淀DNA，降温保存的作用与方式
　　8．加DNase降解核糖核酸后再用SDS与KAc处理的原因
　　9．在保存或抽提DNA过程中，用TE缓冲液的作用
　　10．抽提DNA去除蛋白质时使用酚与氯仿的方法
　　11．用酚与氯仿抽提DNA时还要加少量异戊醇的原因
　　12．pH 8的Tris水溶液饱和酚的作用原理
　附录八　常见载体图谱
　　1．GST融合表达载体
　　2．His标签融合表达载体
　　3．真核表达载体
　　4．RNA干扰载体
　　5．酵母表达载体
　　6．T载体