分子生物学实验（第二版） / 普通高等院校“十四五”规划生命科学类创新型特色教材
￥33.00定价
作者： 李峰等
出版时间：2022-06
出版社：华中科技大学出版社
- 华中科技大学出版社
- 9787568082891
- 2版
- 429809
- 48258995-9
- 16开
- 2022-06
- 164
- 生物类
- 本科
作者简介
内容简介
分子生物学实验（第二版）分三部分，共13章：第一部分分为4章，介绍分子生物学实验基础知识，包括实验室规则、实验室安全知识、常用仪器及其使用、常用培养基和抗生素溶液的配制，以及GenBank数据库；第二部分介绍分子生物学常用实验技术，从第5章到第10章，含11个实验，分别介绍质粒的提取、酶切、电泳、转化、重组及鉴定、PCR技术、核酸杂交技术、外源基因的表达及分离纯化技术；第三部分为分子生物学综合性、研究性实验，从第11章到第13章，含 6个实验。
本书可供生物类、农学类、食品类、药学类等专业的本科院校师生，科研院所科研人员和企事业单位技术人员等使用
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目录
第一部分分子生物学实验基础知识
第1章分子生物学实验室规则和安全/2
1.1实验室一般规则/2
1.2实验室常识/2
1.3实验室安全基础知识/3
1.4实验室合理设计和布局/4
1.5实验室急救/4
1.6废弃物、放射性物质及有毒物质的处理/5
第2章分子生物学实验常用仪器设备及其操作/7
2.1分子生物学实验常用仪器设备/7
2.2冷冻离心机/8
2.3电泳仪/9
2.4分析天平/10
2.5分光光度计/10
2.6数字式酸度计/11
2.7普通PCR仪/12
2.8实时荧光定量PCR仪/13
2.9凝胶成像系统/14
2.10多功能微孔板酶标仪/15
2.11摇床/16
2.12水的净化装置/16
2.13消毒设备/17
第3章细菌培养常用培养基和抗生素溶液的配制方法/19
3.1常用培养基的配制方法/19
3.2常用抗生素溶液的配制方法/20
第4章GenBank数据库简介/22
4.1概述/22
4.2GenBank的建立与发展/23
4.3GenBank数据库结构/25
4.4基因基本信息检索/29
4.5GeneBank在分子生物学中的应用/30
分子生物学实验目录第二部分分子生物学常用实验技术
第5章核酸的制备/36
5.1核酸制备的原理与方法/36
5.2质粒的生物学特性/39
5.3常用克隆载体的特征/41
实验1真核生物基因组DNA提取/42
实验2总RNA的提取及鉴定/44
实验3质粒DNA的微量提取和鉴定/48
第6章DNA的酶切和凝胶电泳/51
6.1限制性核酸内切酶的特性及应用/51
6.2琼脂糖凝胶电泳/53
6.3聚丙烯酰胺凝胶电泳/55
实验4DNA的限制性核酸内切酶酶切及凝胶电泳/57
第7章DNA转化/61
7.1感受态细胞的制备/61
7.2转化/61
实验5大肠杆菌感受态细胞的制备和转化/63
第8章DNA重组的基本流程和方法/68
8.1目的基因的获取/68
8.2DNA分子的体外重组/69
8.3DNA重组体的导入/70
8.4受体细胞的筛选/72
8.5基因表达/73
实验6DNA片段的黏性末端连接法/74
实验7DNA片段的黏平端连接法/75
实验8重组子的筛选与鉴定/77
第9章聚合酶链式反应技术/80
9.1常规PCR技术的原理及操作/80
9.2引物设计原则及合成/84
9.3PCR产物的纯化与鉴定/85
9.4PCR技术的延伸及应用/87
实验9PCR扩增特异性DNA片段及扩增产物的纯化与鉴定/91
实验10实时荧光定量PCR技术检测基因的表达量/93
第10章核酸杂交技术/98
10.1几种核酸探针标记方法/98
10.2核酸探针制备和纯化技术/101
实验11核酸探针制备和纯化/109
实验12菌落原位杂交法/112
实验13miRNA原位杂交/114
第三部分分子生物学综合性、研究性实验
第11章外源基因的表达/118
11.1外源基因在原核生物中的表达/118
11.2外源基因在酵母细胞中的表达/125
实验14外源基因在大肠杆菌中的诱导表达/130
实验15SDSPAGE电泳检测表达的外源蛋白/131
实验16脂肪酶基因在枯草杆菌中表达及表达产物的研究/133
实验17外源基因在酵母细胞中表达及表达产物的研究/135
第12章利用分子生物学技术进行细菌的种属鉴定/137
12.1微生物分类鉴定方法的发展/137
12.216S rDNA分类鉴定技术的原理/138
实验18利用16S rDNA序列分析技术进行细菌种属的鉴定/139
第13章基因表达差异的分析/144
13.1差减杂交/144
13.2mRNA差异显示反转录PCR/145
13.3cDNA代表性差异分析/145
13.4差减抑制消减杂交方法/146
实验19半定量RTPCR技术检测基因的表达差异/147
附录/152
附录A常用单位及换算方法/152
附录B常用核酸、蛋白质换算数据/152
附录C核酸的单位及有关数据/153
附录D常见核酸分子的长度和相对分子质量/153
附录E色素在聚丙烯酰胺凝胶中的移动参数/154
参考文献/155
第1章分子生物学实验室规则和安全/2
1.1实验室一般规则/2
1.2实验室常识/2
1.3实验室安全基础知识/3
1.4实验室合理设计和布局/4
1.5实验室急救/4
1.6废弃物、放射性物质及有毒物质的处理/5
第2章分子生物学实验常用仪器设备及其操作/7
2.1分子生物学实验常用仪器设备/7
2.2冷冻离心机/8
2.3电泳仪/9
2.4分析天平/10
2.5分光光度计/10
2.6数字式酸度计/11
2.7普通PCR仪/12
2.8实时荧光定量PCR仪/13
2.9凝胶成像系统/14
2.10多功能微孔板酶标仪/15
2.11摇床/16
2.12水的净化装置/16
2.13消毒设备/17
第3章细菌培养常用培养基和抗生素溶液的配制方法/19
3.1常用培养基的配制方法/19
3.2常用抗生素溶液的配制方法/20
第4章GenBank数据库简介/22
4.1概述/22
4.2GenBank的建立与发展/23
4.3GenBank数据库结构/25
4.4基因基本信息检索/29
4.5GeneBank在分子生物学中的应用/30
分子生物学实验目录第二部分分子生物学常用实验技术
第5章核酸的制备/36
5.1核酸制备的原理与方法/36
5.2质粒的生物学特性/39
5.3常用克隆载体的特征/41
实验1真核生物基因组DNA提取/42
实验2总RNA的提取及鉴定/44
实验3质粒DNA的微量提取和鉴定/48
第6章DNA的酶切和凝胶电泳/51
6.1限制性核酸内切酶的特性及应用/51
6.2琼脂糖凝胶电泳/53
6.3聚丙烯酰胺凝胶电泳/55
实验4DNA的限制性核酸内切酶酶切及凝胶电泳/57
第7章DNA转化/61
7.1感受态细胞的制备/61
7.2转化/61
实验5大肠杆菌感受态细胞的制备和转化/63
第8章DNA重组的基本流程和方法/68
8.1目的基因的获取/68
8.2DNA分子的体外重组/69
8.3DNA重组体的导入/70
8.4受体细胞的筛选/72
8.5基因表达/73
实验6DNA片段的黏性末端连接法/74
实验7DNA片段的黏平端连接法/75
实验8重组子的筛选与鉴定/77
第9章聚合酶链式反应技术/80
9.1常规PCR技术的原理及操作/80
9.2引物设计原则及合成/84
9.3PCR产物的纯化与鉴定/85
9.4PCR技术的延伸及应用/87
实验9PCR扩增特异性DNA片段及扩增产物的纯化与鉴定/91
实验10实时荧光定量PCR技术检测基因的表达量/93
第10章核酸杂交技术/98
10.1几种核酸探针标记方法/98
10.2核酸探针制备和纯化技术/101
实验11核酸探针制备和纯化/109
实验12菌落原位杂交法/112
实验13miRNA原位杂交/114
第三部分分子生物学综合性、研究性实验
第11章外源基因的表达/118
11.1外源基因在原核生物中的表达/118
11.2外源基因在酵母细胞中的表达/125
实验14外源基因在大肠杆菌中的诱导表达/130
实验15SDSPAGE电泳检测表达的外源蛋白/131
实验16脂肪酶基因在枯草杆菌中表达及表达产物的研究/133
实验17外源基因在酵母细胞中表达及表达产物的研究/135
第12章利用分子生物学技术进行细菌的种属鉴定/137
12.1微生物分类鉴定方法的发展/137
12.216S rDNA分类鉴定技术的原理/138
实验18利用16S rDNA序列分析技术进行细菌种属的鉴定/139
第13章基因表达差异的分析/144
13.1差减杂交/144
13.2mRNA差异显示反转录PCR/145
13.3cDNA代表性差异分析/145
13.4差减抑制消减杂交方法/146
实验19半定量RTPCR技术检测基因的表达差异/147
附录/152
附录A常用单位及换算方法/152
附录B常用核酸、蛋白质换算数据/152
附录C核酸的单位及有关数据/153
附录D常见核酸分子的长度和相对分子质量/153
附录E色素在聚丙烯酰胺凝胶中的移动参数/154
参考文献/155
